保證毛細管電泳儀有效分(fēn)離(lí)的關鍵,使實驗重複性達到應用要求
毛細管電泳儀采用并行毛細管電泳(CE)與熒光檢測技術相結合,能夠對DNA和RNA電泳分(fēn)離(lí)檢測。毛細管列陣是并行毛細管電泳的基礎,根據毛細管列陣的毛細管數量分(fēn)爲96和12通道,每個毛細管首先注入可導電的分(fēn)離(lí)膠,然後對毛細管兩端施加電場,96孔闆中(zhōng)的預檢測樣品開(kāi)始毛細管電泳。依據核酸片段長度不同在凝膠電泳中(zhōng)遷移速度不同的原理核酸樣品被分(fēn)離(lí)檢測。當毛細管中(zhōng)核酸片段通過位于LED和CCD探測器組件之間的檢測窗口時被實時檢測。核酸檢測組件是由一(yī)個LED光源(470納米激發)、照相機鏡頭和CCD探測器組成的光學平台。LED光源(470納米激發)激發核酸樣品中(zhōng)的嵌入染料産生(shēng)熒光信号,然後通過相機鏡頭和特定的濾光器立體(tǐ)成像到CCD檢測器,把實時熒光信号轉換爲實時電信号被軟件實時讀取,由此測繪每個樣品完整的核酸片段分(fēn)布峰圖。
毛細管電泳是一(yī)種在空芯的、極微小(xiǎo)内徑的毛細管中(zhōng)進行的液-液相大(dà)、小(xiǎo)分(fēn)子的蛋白(bái)分(fēn)離(lí)技術。
毛細管兩端分(fēn)别浸入緩沖液中(zhōng),而緩沖液中(zhōng)分(fēn)别插入連有高壓電源的電極,根據被分(fēn)離(lí)物(wù)之間電荷和體(tǐ)積的不同,帶電荷分(fēn)子朝相反極性的電極方向移動。又(yòu)利用毛細管内壁上的電荷和應用的勢能而引起的電解質移動,毛細管内表面帶有矽羟基基團,當毛細管内充滿緩沖溶液時,毛細管壁上的矽羟基發生(shēng)解離(lí),生(shēng)成氫離(lí)子溶解在溶液中(zhōng),這樣就使毛細管壁上形成雙電層,管壁是負電荷層,溶液是正電荷層。
在毛細管的兩端加上直流電場後,帶正電的溶液就會整體(tǐ)向負移動,形成了電滲流。無論是帶正電、帶負電或不帶電的粒子,都在電滲流的作用下(xià),向陰極遷移,帶正電的,受到同方向的電場力作用,遷移快,不帶電的遷移速度次之,帶負電的遷移速度慢(màn),(因爲它受到與電滲流反方向的電場力作用),從而實現各蛋白(bái)組分(fēn)的分(fēn)離(lí)。
毛細管電泳儀的優勢
1、毛細管電泳儀的自動進樣系統*實現全自動原始管上樣,操作人員(yuán)隻需将帶有條形碼的原始管放(fàng)在儀器試管架上,初始操作完畢後即可離(lí)開(kāi),毛細管電泳儀将自動連續運行樣品,無須人爲幹預。樣本經儀器自動稀釋後,由高精氣壓控制的納升級樣品進樣系統将樣品地吸入毛細管内部。
2、樣品溫控系統該高速電泳分(fēn)離(lí)系統整合了一(yī)個高精度Peltier自動溫控裝置,能夠對毛細管中(zhōng)産生(shēng)的焦耳熱進行實時穩定的控制,是保證毛細管電泳儀有效分(fēn)離(lí)的關鍵,使實驗重複性達到應用要求。
3、毛細管電泳儀可以進行多種臨床項目的檢測。
4、毛細管電泳儀檢測結果*數據化、信息化管理利用互聯網技術,實現各項檢測結果的傳輸,包括曲線,工(gōng)作流程和結果報告,并可建立實驗室内部網絡資(zī)庫。
以上便是今天關于保證毛細管電泳儀有效分(fēn)離(lí)的關鍵,使實驗重複性達到應用要求的全部分(fēn)享了,希望對大(dà)家今後使用本設備能有幫助。