應用濾袋技術測定中(zhōng)性洗滌纖維（NDF）的方法
Ringbio纖維分(fēn)析儀
A. 試劑
(a)稱取30.0g十二烷基硫酸鈉（USP）；18.61g 乙二胺四乙酸二鈉（Na2EDTA）；6.81g四硼酸鈉（Na2B4O7）十水；4.56g磷酸氫二鈉（Na2HPO4）-無水；10.0 ml三甘醇C6H14O4；全部溶解在1L水中(zhōng)，适當的攪拌和加熱有助于溶解。檢查适當的pH在6.9—7.1。
(b) α-澱粉酶(Alpha-amylase) –熱穩定細菌α-澱粉酶：活性爲17,400 單位/ mL。1個活性單位表示能将1 mg可溶性澱粉用30 min水解。
(c) 無水亞硫酸鈉（Na2SO3）。
(d) 丙酮：無色，并且蒸發後無殘渣。
B. 安全注意
(a) 丙酮易燃，操作時應在通風櫥中(zhōng)進行，避免吸入或與皮膚接觸。将濾袋放(fàng)入烘箱之前，要确保濾袋*幹燥，丙酮*揮發。
(b) 十二烷基硫酸鈉對黏膜有刺激，因此操作時要帶防塵口罩和手套。
C.設備
(a) 消化裝置- Ringbio纖維分(fēn)析儀
(b) 濾袋- Ringbio濾袋
(c) 封口機
(d) 幹燥器
(e) 分(fēn)析天平-至0.1mg
(f) 電熱幹燥箱
(g) 耐溶劑記号筆
D. 步驟
(a) 濾袋和樣品的準備
1) 用耐溶劑的記号筆給濾袋編号，稱重(m 1)。
2) 直接準确稱取0.5g (± 0.05 g )制備好的樣品 (m) 于濾袋中(zhōng)。樣品需要粉碎過1mm篩。
3) 在距離(lí)濾袋上邊緣大(dà)約4 mm用封口機封口。然後将樣品在濾袋中(zhōng)展平，均勻分(fēn)布。
4) 至少取一(yī)個空白(bái)濾袋(C1)，同時做空白(bái)測定。
5) 一(yī)次 多可以在濾袋架上放(fàng)24個濾袋。無論放(fàng)置濾袋數量多少，8層濾袋架上托盤要全部使用，每層放(fàng)三個濾袋。層與層之間錯開(kāi)120度。然後将裝有濾袋的支架放(fàng)入纖維分(fēn)析儀消煮器中(zhōng)，然後将金屬壓錘放(fàng)在支架頂部，以确保消煮過程中(zhōng)不浮起。
6) 樣品含有大(dà)豆産品或脂肪超過5% ，将裝有樣品的濾袋放(fàng)入帶蓋玻璃容器中(zhōng)，加丙酮使濾袋*浸沒，蓋好蓋子。搖動容器10次，浸泡10 分(fēn)鍾。然後更換新的丙酮，重複上述操作一(yī)次。 後将濾袋取出，放(fàng)在網篩上涼幹。
例外(wài)：烘烤大(dà)豆，由于烘烤大(dà)豆的特殊性，需要采用改進後的下(xià)面脫脂方法。将裝有樣品的濾袋放(fàng)入帶蓋玻璃容器中(zhōng)，加丙酮使濾袋*浸沒，蓋好蓋子。搖動容器10次，然後更換新的丙酮，浸泡12小(xiǎo)時。取出濾袋，放(fàng)在網篩上涼幹。
(b) 當處理24個濾袋時，向2000 mL中(zhōng)性洗滌劑溶液中(zhōng)加無水亞硫酸鈉20 g (0.5 g/50 mL ND 溶液) 和 4.0 g 熱穩定α-澱粉酶。讓無水亞硫酸鈉在溶液中(zhōng)充分(fēn)溶解。向容器中(zhōng)加入該溶液。如果處理樣品少于20 個濾袋，按照每個濾袋加100 mL酸溶液，但不能少于1500 mL，确保濾袋托盤*浸沒。
(c) 打開(kāi)HEAT+AGITATE開(kāi)關，确保濾袋支架攪拌正常。蓋上蓋子并*密封好。 儀器将加熱并維持溶液溫度100°C。 設置處理時間75分(fēn)鍾，包括加熱升溫時間。
(d) 時間到後加熱攪拌自動關停，消煮結束，按下(xià)EXHAUST按鍵，排出廢液，在打開(kāi)蓋子之前一(yī)定将熱的溶液排完。
*警示：消煮器中(zhōng)的溶液是有壓力的。 在打開(kāi)蓋子之前一(yī)定将廢液閥打開(kāi)以釋放(fàng)壓力。
(e) 溶液排完後，打開(kāi)蓋子，關閉排液閥，加2L (70°C~90°C) 蒸餾水，并且第1和第2次淋洗時同時加α-澱粉酶，放(fàng)下(xià)蓋子，但不旋緊。按下(xià)FLUSH按鍵，攪拌3~5 分(fēn)鍾。按下(xià)EXHAUST按鍵，排掉廢液，重複2次，共淋洗3次。
(f) 後一(yī)次淋洗後，加冷的自來水以操作和使冷卻容器，爲下(xià)輪測定做好準備。排幹水，從容器中(zhōng)取出帶濾袋的支架。将濾袋從濾袋支架上取下(xià)來，輕輕擠壓去(qù)掉多餘的水。然後将濾袋放(fàng)入250 mL 燒杯中(zhōng)，加丙酮至浸沒濾袋，浸泡3~5 分(fēn)鍾 ，然後取出并輕輕擠壓去(qù)掉多餘的丙酮。
(g) 在通風櫥中(zhōng)展開(kāi)濾袋，讓其自然幹燥。*幹燥後放(fàng)入102°C±2°C 烘箱烘幹4小(xiǎo)時。
*警告：在丙酮*揮發掉之前不能把濾袋放(fàng)入烘箱中(zhōng)。
(q) 從烘箱中(zhōng)取出濾袋，直接放(fàng)入幹燥器中(zhōng)冷卻至室溫，然後稱重（m2）。
E. 計算
試樣中(zhōng)中(zhōng)性洗滌纖維質量分(fēn)數按以下(xià)公式計算。
NDF (%) = (m2- (m1 x C1)) x 100 / m
其中(zhōng)： m1 爲空袋質量，g；m爲樣品質量，g；m2 爲提取處理後樣品殘渣+濾袋質量，g；C1 爲空白(bái)袋子校正系數(烘幹後質量/原來質量)。
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